植物组培步骤是怎样的?



				
				
筱晓鱼T3Y
10118 次浏览 2024-06-11 提问
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最新回答 (3条回答)

2024-06-13 01:49:01 回答

一个完整的植物组织培养过程一般包括以下几个步骤:
(1)准备阶段
查阅相关文献,根据已成功培养的相近植物资料,结合实际制订出切实可行的培养方案。然后根据实验方案配制适当的化学消毒剂以及不同培养阶段所需的培养基,并经高压灭菌或过滤除菌后备用。
(2)外植体选择与消毒
选择合适的部位作为外植体,采回后经过适当的预处理,然后进行消毒处理。将消毒后的外植体在无菌条件下切割成一定大小的小块,或剥离出茎尖,挑出花药,接种到初代培养基上。
(3)初代培养
接种后的材料置于培养室或光照培养箱中培养,促使外植体中已分化的细胞脱分化形成愈伤组织,或顶芽、腋芽直接萌发形成芽。然后将愈伤组织转移到分化培养基分化成不同的器官原基或形成胚状体,最后发育形成再生植株。
(4)继代培养
分化形成的芽、原球茎数量有限,采用适当的继代培养基经多次切割转接。当芽苗繁殖到一定数量后,再将一部分用于壮苗生根,另一部分保存或继续扩繁。进行脱毒苗培养的需提前进行病毒检测。
(5)生根培养
刚形成的芽苗往往比较弱小,多数无根,此时可降低细胞分裂素浓度或不加,提高生长素浓度,促进小苗生根,提高其健壮度。
(6)炼苗移栽
   
选择生长健壮的生根苗进行室外炼苗,待苗适应外部环境后,再移栽到疏松透气的基质中,注意保温、保湿、遮荫,防止病虫危害。当组培苗完全成活并生长一定大小后,即可移向大田用于生产。
如:茎尖→表面消毒→接种诱导培养基→茎尖生长→病毒检测鉴定→培养无根小植株→培养生根→完整小植株→炼苗20-25天→移栽成活。

2024-06-13 01:49:01 回答

植物组织的培养方法:
1、非试管微组织快繁
  非试管微组织快繁技术是将外植体(一般要求带一叶一芽)放置在室内外普通沙子培养基上进行培养,利用植物腋芽自然倍增达到快速繁殖的目的.一般植物7~15天可以生长出根系.此技术投资低,操作环节少.
2、试管组织培养
  试管组织培养是将外植体(即离体组织、器官或细胞)放置在试管等器皿中在无菌的条件下进行组织培养获得试管苗.
  植物组织培养的优点:
  1、占用空间小,不受地区、季节限制.
  2、不携带病毒
  3、培养周期短
  4、可用组培中的愈伤组织支取特殊的生化制品
  5、可短时间大量繁殖,用于拯救濒危植物
  6、可诱导之分化成需要的器官,如根和芽
  7、解决有些植物产种子少或无的难题,
  8、不存在变异,可保持原母本的一切遗传特征
  9、投资少,经济效益高
  10、繁殖方式多,试用品种多
植物组织培养一般分为以下几种:
  
  1、胚胎培养
  指以从胚珠中分离出来的成熟或未成熟胚为外植体的离体无菌培养.
  2、器官培养
  指以植物的根、茎、叶、花、果等器官为外植体的离体无菌培养,如根的根尖和切段,茎的茎尖、茎节和切段,叶的叶原基、叶片、叶柄、叶鞘和子叶,花器的花瓣、雄蕊(花药、花丝)、胚珠、子房、果实等的离体无菌培养.
  3、组织培养
  指以分离出植物各部位的组织(如分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮、皮层、胚乳组织、薄壁组织、髓部等),或已诱导的愈伤组织为外植体的离体无菌培养.这是狭义的植物组织培养.
  4、细胞培养
  指以单个游离细胞(如用果酸酶从组织中分离的体细胞,或花粉细胞,卵细胞)为接种体的离体无菌培养.
  5、原生质体培养.
  指以除去细胞壁的原生质体为外植体的离体无菌培养.  
  培养材料的采集
  要根据培养目的适当选取材料,选择原则:易于诱导、带菌少.要选取植物组织内部无菌的材料.这一方面要从健壮的植株上取材料,不要取有伤口的或有病虫的材料.另一方面要在晴天,最好是中午或下午取材料,决不要在雨天、阴天或露水未干时取材料.因为健壮的植株和晴天光合呼吸旺盛的组织,有自身消毒作用,这种组织一般是无菌的.培养材料的消毒  
  从外界或室内选取的植物材料,都不同程度地带有各种微生物.这些污染源一旦带人培养基,便会造成培养基污染.因此,植物材料必须经严格的表面灭菌处理,再经无菌操作手续接到培养基上.

2024-06-13 01:49:01 回答

植物组织培养的大致过程是:在无菌条件下,将植物器官或组织(如芽、茎尖、根尖或花药)的一部分切下来,放在适当的人工培养基上进行培养,这些器官或组织就会进行细胞分裂,形成新的组织,不过这种组织没有发生分化,只是一团薄壁细胞,叫做愈伤组织。再适合的光照、温度和一定的营养物质与激素等条件下,愈伤组织便开始分化,产生出植物的各种器官和组织,进而发育成一棵完整的植株。
     组织培养按培养对象可分为组织或愈伤培养、器官培养、植株培养、细胞和原生质体培养等。
1.组织或愈伤组织培养(tissue,  callus  culture)为狭义的组织培养,是对植物体的各部分组织进行培养,如茎尖分生组织、形成层、木质部、韧皮部、表皮组织、胚乳组织和薄壁组织等等;或对由植物器官培养产生的愈伤组织进行培养,二者均通过再分化诱导形成植株。
2.器官培养(organ  culture)即离体器官的培养,根据作物和需要的不同,可以包括分离茎尖、茎段、根尖、叶片、叶原基、子叶、花瓣、雄蕊、雌蕊、胚珠、胚、子房、果实等外植体的培养
3.植株培养(plant  culture)是对完整植株材料的培养,如幼苗及较大植株的培养。
4.细胞培养(cell  culture)是对由愈伤组织等进行液体振荡培养所得到的能保持较好分散性的离体单细胞或花粉单细胞或很小的细胞团的培养。
5.原生质体培养(protoplast  culture)是用酶及物理方法除去细胞壁的原生质体的培养。

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